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艾滋病檢測現(xiàn)狀
三、HIV RNA定量測定（病毒載量檢測）及HIV核酸定性檢測
HIV核酸檢測可用于HIV感染的輔助診斷、病程監(jiān)控、指導(dǎo)治療方案及療效判定、預(yù)測疾病進(jìn)展等。常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)（RT-PCR）、核酸序列擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)（NASBA）、分支DNA雜交實(shí)驗(yàn)（bDNA）以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)。值得注意的是，每一種HIV RNA定量系統(tǒng)都有其最低檢測限，即可以測出的最低拷貝數(shù)或國際單位，RNA定量檢測時(shí)未測出不等于樣品中不含有病毒RNA，因此HIV核酸定性檢測陰性，只可報(bào)告本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性，但不能排除HIV感染；HIV核酸檢測陽性，可作為診斷HIV感染的輔助指標(biāo)，不能單獨(dú)用于HIV感染的診斷。報(bào)告HIV核酸定量檢測結(jié)果時(shí)應(yīng)按照儀器讀數(shù)報(bào)告結(jié)果，注明使用的實(shí)驗(yàn)方法、樣品種類和樣品量，當(dāng)測定結(jié)果小于最低檢測限時(shí)，應(yīng)注明最低檢測限水平。
HIV核酸定性檢測也可用于HIV感染的輔助診斷，目前在分析HIV基因亞型和變異等基礎(chǔ)研究中應(yīng)用。通常使用PCR或RT-PCR技術(shù)，使用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室通用的擴(kuò)增試劑，引物可來自文獻(xiàn)或自行設(shè)計(jì)，應(yīng)盡量覆蓋所有或常見的毒株，也可使用復(fù)合引物。報(bào)告定性檢測結(jié)果時(shí)應(yīng)注明反應(yīng)條件和所使用的引物序列。此外，利用核酸檢測方法的高度敏感性，使用集合核酸擴(kuò)增檢測技術(shù)和方法，對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進(jìn)行集合核酸檢測，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)窗口期感染者。該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。
四、CD4+ T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)
CD4+T淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)最重要的細(xì)胞之一。HIV以CD4+T淋巴細(xì)胞為靶細(xì)胞，感染后可導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞進(jìn)行性下降，使機(jī)體免疫功能受損，最終因機(jī)會性感染及腫瘤而死亡。CD4+T淋巴細(xì)胞絕對值的檢測在HIV感染的以下方面發(fā)揮了重要作用：了解機(jī)體的免疫狀態(tài)以確定疾病分期、監(jiān)測疾病進(jìn)程、評估疾病預(yù)后、制定抗病毒治療及機(jī)會性感染預(yù)防性治療方案及評估抗病毒治療療效等。目前用于CD4+T淋巴細(xì)胞檢測的方法分為自動檢測方法和手工操作法。自動檢測方法包括流式細(xì)胞儀（單平臺一步法、多平臺三級程序法）和專門的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，手工操作方法則需要顯微鏡或酶聯(lián)免疫試驗(yàn)設(shè)備。目前檢測CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法為流式細(xì)胞儀，可得出CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞的絕對值及占淋巴細(xì)胞的百分率。為確保檢測的準(zhǔn)確性，應(yīng)制定質(zhì)量保證計(jì)劃，建立內(nèi)部質(zhì)量控制制度，并參加室間質(zhì)量評價(jià)。
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